由于每个患者对医治药物的吸收和代谢分歧，正确的给药对预防毒性反映和维持药物在医治水平至关沉要，这就是患者血清或血浆样本中的医治药物监测（TDM）阐扬作用的处所。该分析的金尺度是LC-MS/MS；然而当样本量比力大时，手动造备样本是一个很大的挑战。在这里，我们描述了若何使用Hamilton MassSTAR自动化系统与MassTox®TDM Series A通过LC-MS/MS对100多种药物进行自动样品造备和分析。

系统描述

MassSTAR基于Hamilton Microlab® STARlet平台，建设4个通路：CO-RE®抓手、条形码阅读器和一个整合的离心理。台面上由样本载架、试剂载架、尺度品/对照载架、深孔板(DWP)和移液吸头载架以及Hamilton加热振荡器(HHS)组成。每次运行，系统最多可处置96份样本，蕴含对照和尺度品。

试剂盒描述

样品造备基于Chromsystems的MassTox®TDM Series A，这是一种
？榛低，由三个部门组成：特定参数集、色谱柱和BASIC Kit A。参数集蕴含特定药物的单个校准品、对照品和内标物。色谱柱自身可监测近200个参数，而无需色谱柱切换或扭转流动相。结合所有参数集中险些一样的样本造备工作流程，这有助于最大限度地削减尝试室的工作量。到目前为止，超过100个参数的样品造备能够在MassSTAR上实现自动化，未来会有更多。这些药物蕴含抗抑郁药、抗癫痫药、抗真菌药、麦考酚酸和心灵安谧药。为了获得较高的数据正确性，险些所有的参数都由内部尺度来保险。了局的可追忆性通过使用基于基质的校准资料来保障。

工作流程

首先，加载所有资源，并追踪样本和板的条形码。均质化后，将50µl样本/校准品/对照品转移至96深孔板中。参与25µl提取缓冲液，并以600 rpm转速振荡2分钟。将250µl造备的内标溶液移液至各孔中，并以1000 rpm转速振荡30秒。而后以2000xg离心5分钟，分离沉淀物。将上清液转移至第二个深孔板中，并用稀释缓冲液稀释。稀释因子取决于参数设置和特定质谱仪。

技术

其中一个关键特点是设备的吸放液全程实时监控 (TADM™)技术。实时监控每个移液通路中的每个吸液和分液步骤。TADM™通过可追忆的数字审计跟踪验证样本转移，并鉴别谬误，如样本中有血凝块或转移的体积不正确。图形用户界面 (GUI) 疏导用户实现加载过程以及库存查抄（例如，条形码匹配、查抄微孔板地位是否正确、验证试剂的适当液位）。这意味着在运行起头前，所有试剂和耗材均可获得足够的数量，确保不必要进一步的用户过问，从而耽搁无人值守功夫。描述性界面监测样品造备过程的实时状态，并显示系统接下来将执行的步骤。GUI还预防无效的用户输入，并；げ街栉募免受未经授权的操作。此表，为MassTox®TDM Series量身定造的试剂载架可能将分析试剂加载到其原始容器中，试剂不用转移，节俭功夫，预防传染和试剂混合，并削减液体的蒸发。

了局

测定了所有药物的回收率，回收率取决于分析物，领域81%-115%。

测定了沉复性、中央精密度和巢轮性，以确定总体步骤的精度。将至少两种分歧浓度水平的样品造备10次，并在单个序列中进行测定。变异系数为0.6到13.7%之间，取决于相应的分析物和浓度水平。在分歧日期造备并测定至少3个分歧浓度水平的样品（20×5或10×2×2设计），得到的变异系数在0.9%至18.9%之间。此表，在三个分歧的尝试室中，在五个分歧的日期，使用进行五次样品造备（3x5x5设计），测定至少三个浓度水平的巢轮性。所得变异系数在3.2～25.7%之间。说明书中提供了每个参数集的综合数据。

对于所有分析物，通过向血清和血浆样本中加划定量的尺度品测定定量下限(LLOQ)和定量上限(ULOQ)。对于所有药物，LLOQ和ULOQ涵盖医治药物监测所需的临床有关浓度领域。

步骤比力

使用MassTox®TDM Series A采集并分析真实患者样本。所有样本均已手动处置并在MassSTAR上进行比力。

了局批注，MassSTAR样本造备与手动处置之间拥有优良的有关性和可比性。