

简介
FLUOREYE是一种荧光检测解决规划,专为与现有系统无缝集成而设计,无需额表空间或设备。它有两个引发波长和两个检测波长,可实现集成的荧光信号定量和后续均一化,无需用户过问。在这里,我们展示FLUOREYE可用于丈量被SYBR™ Safe(一种高活络度的荧光核酸染料)染色的活细胞荧光强度,从而确定96孔板中造就的细胞的融合度。因而,FLUOREYE将其用处扩大到细胞生物学领域。在Hamilton自动化液体处置设备上使用FLUOREYE进行自动细胞融合度丈量,能够在96孔板中追踪造就细胞的成长,而不必要显微镜、精密的成像设备或复杂的分析软件。依照易操作的自动化工作流程,把细胞用SYBR™ Safe核酸染料(Invitrogen S33102)进行染色,而后将造就板放在工作站台面上进行分析。这种步骤削减了成本和用户过问,同时提高了可沉复性和通量。

利益
1. 在细胞检测或细胞造就的自动化解决规划中,它是一种丈量细胞融合度的实用、经济高效的工具。
2. 无需着手就能够自动选择相宜的功夫点起头细胞造就尝试、传代或进行细胞增殖尝试。
3. 高度可沉复、尺度化和正确的细胞融合度测定步骤。

使用Hamilton FLUOREYE自动丈量细胞融合度是传统显微镜成像的一种高性价比的代替步骤,也是哺乳动物细胞成长追踪的一种无人值守、易于整合的台面式解决规划。

细胞造就
在尺度造就前提下,在增长了10%FBS(Gibco,A5256801)的高糖DMEM(Gibco,L0101-500)造就基中造就HEK293细胞。尝试前一天,对细胞进行计数,并将其接种在玄色96孔板(Greiner CELLSTAR 655090)中。SYBR™ Safe染色和FLUOREYE丈量在Hamilton Microlab STAR平台上进行。为预防移液过程中细胞脱落,每一步操作实现后,孔中都要留出至少50µL的液体。用成长造就基将50µL SYBR Safe染料稀释到500倍,而后每孔参与50µL染色液,最终稀释到1000倍。

用户将细胞放回造就箱造就30分钟。造就实现后,将96孔板沉新放到STAR平台上。洗濯细胞并代替为D-PBS造就基,以削减布景荧光。FLUOREYE丈量在470nm波长下进行,LED功率为40。为了将测得的强杜纂细胞融合度进行定量比力,进行了手动显微镜查抄。
使用ImageJ软件进行成像和融合度分析
用于融合度丈量的亮。˙F)图像由建设5倍物镜和Axiocam 305成像装置的蔡司Axiovert 5显微镜拍摄。对BF的tiff图像体式进行裁剪以削减孔壁阴影,并使用ImageJ(1.54f 版)进行分析。丈量像素面积,并以总覆盖面积的百分比暗示融合度。

技术
FLUOREYE体积幼巧,所需空间极幼,可轻松集成到现有设备中,升级到荧光检测解决规划,而无需昂贵的整合、表罩、运输设备或为预防碰撞所进行的编程工作。FLUOREYE拥有两个引发波长和两个检测波长,可进行集成的荧光定量,随后无需用户过问的均一化使之可与目前市场上的很多试剂盒兼容。

了局
用SYBR Safe核酸染料对HEK293细胞进行染色,而后用FLUOREYE在470nm波长下丈量荧光强度。每孔强杜纂BF显微镜成像推算出的融合度有关。总体而言,现实细胞融合与FLUOREYE丈量的荧光强度之间存在很强的有关性(R2=0.976)。细胞聚合度和荧光强度之间的线性有关在10% - 80%之间尤为正确,而在密度较高时,差距增大,这可能是由于细胞压实和过度成长造成的。此表,FLUOREYE读数显示,细胞融合度在10 - 80%之间时,复孔之间的差距极度。–V <8%)。


QQ:3846578731
邮箱:Jili@hamilton.ch
公司网址:www.hamiltoncompany.com
地址:上海市浦东新区盛夏路666号E楼101室
扫一扫 微信征询
©2026 3499拉斯维加斯 版权所有 登记号:沪ICP备2021011148号-5 技术支持:化工仪器网 Sitemap.xml 总接见量:137289 治理登陆